mRNA体外转录合成

服务介绍  Service Introduction

        mRNA疫苗在COVID-19新型冠状病毒传染病的预防上起到巨大的作用而被业界所认可，mRNA therapeutics成为了一种拥有无限前景，可能颠覆现代医学技术的基因治疗平台。与重组蛋白相比，mRNA生产通过体外转录合成，更加快速灵活，低成本。在过去的十几年里，mRNA化学修饰和递送系统的重大进展快速推动该项技术应用于临床研究。mRNA 的应用前景非常广阔。 除了能够用于预防传染性疾病，mRNA 疫苗也为治疗 肿瘤、免疫疾病带来了新的星火。

        艾基生物研发了可携带100~150bp的长链 polyA的载体且可以进行体外转录的质粒， 线性化的质粒用于T7体外转录方式制备mRNA，基因长度可以长达2kb~3kb。经过加帽和磁珠纯化等一系列特定工艺流程，我们体外制备的mRNA分子可针对于不同的下游实验进行定制以及优化，如细胞转染、胚胎注射、生物药和疫苗研制等。

服务优势  Service Advantages

         A.   使用来源于噬菌体的T7 RNA聚合酶进行体外转录，可高效合成3 kb以上长度的mRNA分子

         B.   为mRNA分子添加5’ m7G帽子和3’100nt长度的 polyA尾巴，可以添加100个polyA以增强mRNA的稳定性和

               翻译效率

         C．免费提供不同物种的密码子优化，增强mRNA翻译效率D． 转录产物经过DNase和磷酸酶处理，去除残留DNA

               模板和mRNA 5’磷酸基团

载体图谱

合成流程以及验证

实验验证

        我们的体外转录mRNA经过专门优化，加强了稳定性并有助蛋白高效翻译。下图为使用我们设计的EGFP mRNA体外成功转染HEK293T细胞以及纯化后的mRNA电泳的案例：

293Ta-mRNA-0.5ug-转染48h-100x-1

Cap 1帽子修饰的EGFP mRNA转染HEK293T细胞-1

Cap 1帽子修饰的EGFP mRNA转染HEK293T细胞-2

体外转录原理

左图：反应时间与产量的关系         右图：模板投入量与产量的关系

运输/储存 

        干冰运输，收到样本后-80℃保存。

注意事项

        1.艾基提供的mRNA保存于无酶水中并通过干冰形式运输。

        2.接收到货物后，请将mRNA放置于-80℃长期保存（可稳定保存至少6个月），或者放置于-20℃保存一周。

        3.mRNA的保质期为1年。请勿反复冻融mRNA，否则将导致其显著降解。